中村贵宏、风间智彦、长冈佑树、稻茂泰司、麦岛秀夫、高桥翔里和松本太郎
简介:脂肪来源的干细胞/基质细胞 (ASC) 被认为是治疗性血管生成的一种有前途的细胞来源,因为这些细胞可以通过微创手术制备,并且它们会分泌多种血管生成细胞因子。在本研究中,研究了供体年龄和传代次数对 ASC 条件培养基 (ASC-CM) 血管生成活性的影响。
方法:培养人类 ASC(供体年龄为 5 个月至 82 岁;n = 10),并在第 2、4 和 6 代收集 ASC-CM。使用管形成试验评估 ASC-CM 的血管生成活性,该试验使用一种共培养人脐静脉内皮细胞 (HUVEC) 和成纤维细胞的系统。使用酶联免疫吸附试验测量每个 ASC-CM 中的血管内皮生长因子-A (VEGF-A) 和肝细胞生长因子 (HGF) 的浓度。
结果:供体年龄超过 60 岁会影响第 4 代及以后的 ASC 增殖能力。ASCCM 显著增强了 HUVEC 管形成,并且这种反应不受供体年龄的影响。与第 4 代 ASC-CM 相比,第 6 代 ASC-CM 的管形成能力较低,尽管该能力仍与阳性对照(含有 10 ng/mL VEGF-A 的培养基)相当。供体年龄超过 26 岁会影响 ASC-CM 中的 VEGF-A 水平,但不会影响 HGF 水平,尽管我们发现 VEGF-A/HGF 水平与管形成能力之间没有直接相关性。
结论:我们的结果表明 ASC-CM 的血管生成活性下降与传代次数有关,但与供体年龄无关。