微生物与生化技术杂志

抽象的

刺猬血清中 L-天冬酰胺酶的分离、部分纯化和表征

Ekpa Emmanuel、Nzelibe HC 和 Onyike E

进一步探索治疗白血病的其他来源的需求促使了这项研究。众所周知，L-天冬酰胺酶在治疗白细胞癌症方面具有很大的潜力，但这种酶的来源及其特性决定了这种药物的疗效。一般来说，天冬酰胺酶要适合用于抗肿瘤治疗，必须满足多种标准。所选生物体应能大量或高产地产生天冬酰胺酶，并且应能够从简单的哺乳动物来源中分离出来。为纯化酶而开发的程序应尽可能快速和简化。纯化的酶应具有长期储存稳定性、在生理 pH 下的最大活性以及低于血液中底物浓度的底物 Km。因此，本研究的目的是部分纯化和表征来自 Hedgehog 血清的这种酶，以便将其抗白血病潜力与文献中记载的潜力进行比较，以备将来可能的医学应用。使用硫酸铵分馏、透析、离子交换和凝胶过滤色谱法四步法，从刺猬血清中分离并部分纯化 L-天冬酰胺酶，刺猬血清也是许多其他有用蛋白质（包括抗蛇毒）的储存库。该酶的总产量为 77.58%，最佳 pH 和温度分别为 7.8 和 39ºC，Km 为 0.0125 mM。凝胶过滤得到的近似分子量为 139,000 Da，而 SDS PAGE 表明亚基分子量分别为 36,000 和 34,600 Da。该酶还催化谷氨酰胺的水解，尽管作用轻微。Mg2+ 和 Zn2+ 可作为刺猬血清 L-天冬酰胺酶的活化剂，同时还观察到重离子（如 Hg2+）的抑制作用。这项研究表明，哺乳动物来源的这种酶将来可能更适合用于治疗天冬酰胺依赖性肿瘤。