微生物与生化技术杂志

抽象的

中/高通量 D-氨基酸氧化酶比色法测定 D-氨基酸。氨基酸消旋酶的应用

阿曼德·伯尼曼、马塞洛·阿尔维斯-费雷拉、尼古拉斯·科特诺安、娜塔莉·查蒙德和保拉·米诺普里奥

样品中游离氨基酸的检测和定量仍然需要复杂、强大且通常成本高昂且有时耗时的技术，例如气相色谱法、高效液相色谱法或高选择性和灵敏度的柱切换技术。在此，我们致力于开发一种简单的一步式微量滴定板方法，以基于酶 D-氨基酸氧化酶和化学计量过氧化氢的产生来检测和/或定量溶液中的大多数 D-氨基酸。加入辣根过氧化物酶和 OPD 可以通过反应产物的吸光度与等摩尔量的 L/D 氨基酸标准的连续稀释度进行比较来测定 D-氨基酸浓度。该方法可轻松适应氨基酸消旋酶活性的中/高通量分析。