高等化学工程学报

抽象的

用于聚合酶链式反应/连接酶检测反应顺序操作的微流控反应器

桥本正彦、冢越和彦和史蒂文·A·索珀

我们开发了一种用于检测基因组 DNA 中单碱基突变的微流体生物反应器，其中依次进行初级聚合酶链式反应(PCR) 和等位基因特异性连接检测反应 (LDR)。从 LDR 产量和保真度方面彻底研究了初级 PCR 的残留对后续 LDR 的影响，我们发现在扩增子掺入 LDR 相之前不一定需要对其进行 PCR 后处理，这使我们能够使用简单的扩散混合器在线混合 PCR 后溶液和 LDR 试剂。我们还进行了数值分析，粗略估计了扩散混合所需的通道长度。我们成功地证明了该系统能够以相对较高的处理速度（总处理时间 = 约 28.1 分钟）检测出 1000 个正常序列中的一个突变 DNA。