干细胞研究与治疗杂志

抽象的

miRNA 慢病毒载体在心脏祖细胞中的整合和基因靶向功效

玛丽安娜·洛佩菲多、斯特凡尼亚·克里帕和毛里里奥·桑保莱西

干细胞和祖细胞心脏细胞对于可能的细胞治疗应用具有挑战性。一些研究实验室正在探索自体细胞治疗方法的可行性，以摆脱导致不良副作用的免疫抑制治疗。最近，我们表明，由于 miR669 失调，从 Sgcb 基因缺失小鼠（2E 型肢带型肌营养不良症的动物模型）中分离出的心脏祖细胞在体外和体内经历了异常分化。该 miRNA 家族能够抑制直接针对 MyoD 3' UTR 的骨骼肌生成程序。利用慢病毒技术，我们提供了证据，表明可以通过 miRNA669 过表达来挽救营养不良异常表型，而无需进行基因校正。然而，携带 miRNA 的病毒在转导时如何在基因组中定位以及它们的定位位点如何影响挽救潜力尚未分析。在这里，我们研究了携带 pre-miR669 的慢病毒载体在感染的多克隆和源自 Sgcb 心脏祖细胞的克隆群体中的整合情况。我们的研究表明，逆转录病毒插入位点 (RIS) 大部分局限于编码基因 (65%)。尽管我们的分析存在局限性，但我们没有发现与癌症相关的基因，并且几个测序的 RIS 揭示了主要与肌肉功能有关的基因。因此，我们的数据显示慢病毒载体插入情况是细胞特异性的，但是，靶细胞的染色质状态对病毒整合有积极影响。