细菌学与寄生虫学杂志

抽象的

检测和鉴定钩端螺旋体的分子方法

艾哈迈德·艾哈迈德、马丁·P·格罗布施、保罗·R·克拉泽和鲁迪·A·哈茨克尔

传统的钩端螺旋体病诊断和钩端螺旋体属的鉴定主要依赖于血清学。血清学诊断的一个主要缺点是它需要足够水平的抗钩端螺旋体抗体，因此危及疾病早期急性期的确诊。确定钩端螺旋体血清型的交叉凝集素吸收试验 (CAAT) 是一种技术要求高且费力的方法，因此仅在少数实验室进行。新型分子诊断测试主要依赖于聚合酶链反应 (PCR)。PCR 完美地补充了血清学检测，因为它在症状出现后的前 5 天内特别敏感。实时 PCR 速度快，并且已被证实具有很高的临床准确性。引入分子技术来定义钩端螺旋体物种彻底改变了该属菌株的分类，因为物种和血清群似乎几乎没有相关性。分子物种形成的参考测试基于确定 DNA 同源性。这种方法繁琐且不方便用户使用，因此正逐渐被其他技术所取代。迄今为止，已有多种分子分型方法。最有吸引力的是那些提供直接数字和电子便携数据的技术。这些技术包括荧光扩增片段长度多态性 (FAFLP)、阵列分型、多位点可变串联重复序列分析 (MLVA) 和基于序列的系统发育，以及某种程度上的脉冲场凝胶电泳 (PFGE)。多位点序列分型 (MLST) 是确定钩端螺旋体菌株多样性的最可靠方法，未来可能只有全基因组序列的系统发育才能超越它。