干细胞研究与治疗杂志

抽象的

具有 ΒETA2/Neurod1 转导的小鼠胰岛素瘤细胞条件培养基可在体内和体外有效诱导脂肪间充质干细胞分化为 β 样细胞

河本浩一、矢部重治、绀野正光、石井英志、西田直宏、小关淳、福田五月、富丸芳人、滨直树、和田浩、小林正吾、江口秀俊、种村正宏、伊藤敏则、李恩英、向井绘里、高志三木、土木雄一郎、正树Mori、Tatsuo S Hamazaki、Hiroaki Nagano 和 Hitoshi Okochi

背景：间充质干细胞(MSC)，包括脂肪组织来源的间充质干细胞 (ADSC)，具有多能性，可分化成各种细胞类型，包括胰腺 β 细胞。因此，ADSC 是治疗 1 型糖尿病(T1DM) 的潜在细胞来源。然而，目前的体外方案不足以诱导完全成熟的胰岛素产生 β 细胞。在本研究中，我们评估了使用鼠胰岛素瘤细胞系来源的条件培养基 (MIN6-CM) 过表达碱性螺旋-环-螺旋转录因子家族成员 ΒETA2 (NeuroD1) 以提高 ADSC 分化为胰岛素产生细胞的能力的有效性。
方法：从 C57BL/6 小鼠中分离小鼠 ADSC，用几种转录因子 (TF) 转导，并建立稳定的转染子。制备了 MIN6-CM。通过单次注射链脲佐菌素使同基因受体小鼠患上糖尿病，并将分化细胞移植到受体小鼠的肾包膜下。接下来，监测血糖水平。
结果：单独使用 CM 足以在体外诱导胰岛素 mRNA 表达。然而，未检测到其他 TF。与 MIN6-CM 一起培养的 ADSC在体外诱导胰岛素表达，但检测到了其他与 β 细胞相关的 TF。然而，MIN6-CM 中的 BETA2 转导导致多种 β 细胞表型标志物的强劲表达。此外，胰岛素含量分析显示体外胰岛素蛋白表达。此外，体内移植研究揭示了同时使用 BETA2 转导和 CM 的有效性。
结论：这些结果表明，除了基因操作之外，细胞因子和生长因子的平衡也有利于 ADSC 有效分化为胰腺 β 细胞。我们的技术可以为 β 细胞分化和基于细胞替代的新型 T1DM 疗法提供途径。