热带病与公共卫生杂志

抽象的

在伊朗东南部，对固定染色载玻片进行嵌套聚合酶链式反应 (PCR) 并与全血作为 DNA 来源进行比较

易卜拉欣扎德·阿德尔、穆罕默德·赛义德和 Polshekan Mir Ali

厚血涂片 (TBS) 的显微镜检查仍然是诊断人类疟疾的首选方法。最近，嵌套 PCR 等替代诊断方法已用于检测和鉴定疟原虫。本研究的目的是比较使用从全血中提取的 DNA 与固定染色载玻片进行的嵌套 PCR 的灵敏度和特异性。125 个血液样本（包括 76 个（60.8%）男性和 49 个（40.2%）女性）完成了检查。根据在吉姆萨染色的薄血膜中计数的 200 个白细胞总数计算阳性样本中的寄生虫血症百分比。使用特异性引物对提取的 DNA 样本进行嵌套 PCR 检测以扩增 18ssr RNA 疟原虫基因。在所有 125 份血液样本中，显微镜检查发现 50 份（40%）疟原虫呈阳性（41 份（32.8%）间日疟原虫、9 份（7.2%）恶性疟原虫），75 份（60%）疟原虫呈阴性。全血样本嵌套 PCR 检测到 66 种（52.8%）疟原虫：47 种（37.6%）间日疟原虫、13 种（10.4%）恶性疟原虫，6 种（4.8%）间日疟原虫和恶性疟原虫混合感染。外周血切片嵌套 PCR 检测到 49 种（39.2%）疟原虫：34 种（27.2%）间日疟原虫、10 种（8%）恶性疟原虫，5 种（4%）间日疟原虫和恶性疟原虫混合感染。研究表明，当从血液中提取目标DNA时，嵌套PCR的敏感性和特异性分别为96％和76％，当从涂片中获得DNA时，嵌套PCR的敏感性和特异性分别为78％和86％。这些研究表明可以从TBS中成功分离疟原虫DNA，表明这种DNA保存方法对于流行病学研究来说是合适且方便的。