水产养殖研究与发展杂志

抽象的

鲶鱼（Pangasius pangasius）血清球蛋白组分的多肽分析及抗鲶鱼血清球蛋白-HRPO免疫偶联物的开发用于快速检测细菌感染

Harresh Adikesavalu、Pradipta Paul、Siddhartha N Joardar 和 Jawahar T Abraham

细菌性疾病仍然是商业鲶鱼养殖的主要经济因素。因此，正确诊断疾病对于有效的治疗措施和防止生产损失非常重要。本研究旨在通过盐分分离和 SDS-PAGE 分析分离和表征鲶鱼 Pangasius pangasius 的血清球蛋白。分离的 P. pangasius 血清球蛋白的蛋白质谱显示总共 12 个条带，即 136.64、120.58、95.87、79.92、72.67、63.04、45.99、43.32、38.65、34.82、28.46 和 19.08 kDa。按照高碘酸钠法制备抗巴氏血清球蛋白 (ASG) 辣根过氧化物酶 (HRPO) 免疫偶联物 (ASGHRPO 免疫偶联物)，并在家兔体内产生针对该偶联物的免疫血清。通过斑点 ELISA 和直接 ELISA 评估了 ASG-HRPO 免疫偶联物的血清反应性。在斑点 ELISA 中，仅当 ASG-HRPO 免疫偶联物以纯或 1:10 稀释使用时才会出现浓色斑点。同样，直接 ELISA 结果显示对巴氏血清球蛋白组分作为抗原的血清反应性较低，稀释度滴度值 <200 。还通过实验接种分别进行了斑点 ELISA 以检测巴氏鲶体内是否存在针对嗜水气单胞菌和迟钝爱德华氏菌的特异性抗体。两种情况下均观察到了强烈的色斑形成，这又表​​明 ASG-HRPO 免疫偶联物在检测 P. pangasius 血清中的抗 A. hydrophila 和抗 E. tarda 抗体方面具有特异性。在加入致敏鱼免疫血清并孵育后出现色斑表明 ASG-HRPO 免疫偶联物可用于特异性抗体的血清监测和 E. tarda 和 A. hydrophila 引起的疾病的血清诊断。