微生物与生化技术杂志

抽象的

海洋内生菌分离株曲霉菌 ALAA-2000 的肿瘤抑制剂 L-谷氨酰胺酶生产工艺优化

Mervat Morsy Abbas Ahmed、Taher M Taha、Nageh F Abo-Dahab 和 Fareed SM Hassan

L-谷氨酰胺酶因其潜在的应用而受到广泛关注。从海洋软海绵Aplysina fistularis中回收的所有内生真菌均能产生L-谷氨酰胺酶。在筛选程序中，曲霉菌属ALAA-2000表现出最高的L-谷氨酰胺酶生产水平。在不同发酵模式和参数下评估了曲霉菌属ALAA-2000的L-谷氨酰胺酶产量。优化发酵参数后，L-谷氨酰胺酶合成产量增加。40°C热水是从大豆中提取的最佳浸出剂，在固态发酵（SSF）下生产L-谷氨酰胺酶（21.89 U / ml）。在深层发酵（SmF）下经过两天的培养期后，L-谷氨酰胺酶活性达到最高（91.92 U / ml）。在pH 4、27°C的SmF条件下，L-谷氨酰胺、葡萄糖、半胱氨酸和氯化镁可使曲霉属ALAA-2000产生最高的L-谷氨酰胺酶。通过硫酸铵沉淀和DEAE-纤维素柱层析，从曲霉属ALAA-2000的培养上清液中获得L-谷氨酰胺酶的单峰，这反映了L-谷氨酰胺酶的单体性质。纯化L-谷氨酰胺酶的优化参数为：pH 10，在40°C至50°C下稳定，反应时间30分钟，底物浓度4.38mg / ml。而最大活化剂阳离子是Na +，不同的EDTA浓度对L-谷氨酰胺酶活性没有影响，这意味着L-谷氨酰胺酶表现为非金属酶。