微生物与生化技术杂志

抽象的

枯草芽孢杆菌NRRL 41270发酵产生的胞外低分子量酯酶的纯化、氨基酸测序和热稳定性

Papagianni M 和 Papamichael EM

发现枯草芽孢杆菌 NRRL 41270 发酵液中的细胞外酯酶活性存在于分子量小于 10 kDa 的小蛋白中。纯化后，对荧光素丁酸酯的酯酶活性估计为 12 U/min/mg 蛋白。在 5 μM 底物浓度下观察到酶饱和。产生的酯酶水解三丁酸甘油酯。其比活性估计为 17.8 μmol 酸释放/min/mg 蛋白。对小蛋白进行尺寸排阻色谱分析、SDS-PAGE 和氨基酸测序。分析显示以下氨基酸残基的序列：eevaetysfyhitphdystshispapvqffspap，根据该序列，该分子具有 34 个氨基酸残基，计算分子量为 3853，这与凝胶过滤和 SDS-PAGE 结果一致。基于序列的分析和生物信息学工具的使用表明，该酶与已知蛋白质没有显著的相似性，但显示出一种强疏水性分子，N 端具有 α 螺旋构象，分子的其余部分富含 β 折叠。该酶似乎具有热稳定性，在 60°C 下孵育 120 小时后仍能保持 85% 以上的原始活性。生产生物和微酶的特征表明，这是一种具有生物技术意义的生物催化剂，应进一步研究其稳定性和生产特性。