石山和树、小川美香、加藤秀文、竹下恭介、上田龙三、中山隆之*
背景:胎牛血清 (FBS) 是细胞培养中最常用的生长因子。然而,随着细胞疗法的扩展,对符合良好生产规范标准的无异源细胞培养补充剂的需求正在增加。人血清已被提议作为 FBS 的替代品。由于捐赠者有限和医疗资源的有效利用,我们尝试从过期的新鲜冷冻血浆 (FFP) 和冷冻上清液 (CS) 中生产血清,并将它们作为 FBS 替代品进行测试。
结果:我们发现,将 FFP 或 CS 与生理水平的凝血酶和氯化钙 (CaCl 2 ) 一起孵育 1 小时可耗尽几乎所有的纤维蛋白原。与 FBS 和人血小板裂解物 (hPL) 进行的比较增殖研究表明,与 FBS 相比,FFP 血清对 8 种人类细胞系表现出相似或更大的增殖作用:骨髓间充质基质细胞 (BMSC)、脂肪组织间充质基质细胞 (ADSC)、HeLa、293T、MG-63、HL-60、K562 和 Meg-A2(Saos-2 细胞除外),而 CS 血清对 BMSC、ADSC 和 Saos-2 细胞表现出较弱的增殖作用。hPL 比 FFP 和 CS 血清更能促进 BMSC 和 ADSC 细胞的生长。
结论:可以利用凝血酶和 CaCl 2快速且以节省血液制品的方式生产 FFP 和 CS 血清,并可作为培养人体细胞的 FBS 的有效替代品。