阿卜杜勒·拉菲克·汗、阿里·奥赛姆、哈立德·穆罕默德·汗、沙齐亚·姆塔扎、萨拉·阿尔特莱夫、瓦利德·塔米米、瓦卡斯·贾米尔和易卜拉欣·阿尔特莱夫
目的:利巴韦林 (RBV) 的测定对于丙型肝炎患者的治疗药物监测非常重要。开发并验证了一种简单快速的高效液相色谱 (HPLC) 方法,无需蒸发步骤即可测定血清样本中的利巴韦林浓度。
设计与方法:将约 500 μl 血清样本、50 μl 内标和 20 mM 醋酸铵缓冲液 (pH=8.5) 混合 30 秒并离心。将上清液转移至预处理的苯基硼酸柱中进行固相萃取。所有柱在真空度不超过 10 psi 的条件下用 1 mL 20 mM 醋酸铵缓冲液清洗两次。用 300 μl 3% 甲酸洗脱利巴韦林和内标。将 100 μl 的等分试样注入 HPLC 系统。
结果:该方法在 0.1-8.0 mg/l 范围内呈线性,检测限为 0.05 mg/l。方法比较的相关系数为 0.975,p 值为 0.116,表明结果重现性良好。在三个不同浓度下检查了平均准确度,发现三个水平的平均准确度都在 107-110% 之间。利巴韦林在 0.1-8.0 mg/l 范围内的提取效率为 65.5%,50 mg/l 内标的提取效率为 71.2%。在 0.5、2.5 和 5.0 mg/l 下测定了测定内精密度,发现 % CV 分别为 2.2%、5.0%、4.5%。三个水平的注射重现性分别为 5.5%、6.1% 和 3.3%。消除重力流和蒸发步骤使该方法更快、更易于利巴韦林样品的常规分析。
结论:建立的HPLC法快速、准确、灵敏,适用于我院丙型肝炎患者血清利巴韦林浓度的测定。