微生物与生化技术杂志

抽象的

利用农残固态发酵法从 Solanum tuberosum L. 的内生真菌 Penicillium javanicum 生产葡糖淀粉酶。

Mervat Morsy Abbas Ahmed El-Gendy* 和 Nourah Hassan Alzahrani

评估了 14 种不同的内生真菌以花生壳、玉米芯、玉米秸秆、甘蔗渣、麦秸、大麦秸秆和稻草等农工业残余物作为可再生廉价底物进行固态发酵生产糖化酶的情况。其中，从 Solanum tuberosum L. 根部获得的内生真菌 Penicillium javanicum 以花生壳为固体底物表现出最高的糖化酶产量（289.23 ± 0.80 U/gds）。在固态发酵工艺的优化生产参数下（250 毫升锥形瓶中装有 20 克花生壳，添加 30% 大豆废料，这是一种廉价、环保的酶生产方式，筛分至 1 毫米，用马铃薯加工废水润湿至 55% 的初始水分含量，pH 值 5.0，接种强度 2 × 108 孢子，在 30°C 下培养 5 天发酵期），葡糖淀粉酶产量增加了四倍（4.19 倍）。在我们的研究中，酶分泌与营养期之间存在密切的关系。纯化的酶经(NH4)2SO4沉淀和Sephadex G-100凝胶分级后，比活力分别为81.60和237.24 U/mg，酶回收率分别为51.11和22.14%，纯化倍数分别为2.2和6.39倍，最大活性在40-50°C和pH 5，在温度高达60°C和pH 5-7时稳定并保持100%的活性。该酶不是金属酶，因为50 mM的EDTA和EGTA对葡糖淀粉酶活性没有影响，但它被认为是丝氨酸蛋白酶，因为它在10和50 mM的丝氨酸蛋白酶抑制剂对甲基磺酰氟(PMSF)作用下分别失去了68%和92%的活性。