口腔健康和牙科管理

抽象的

口腔黏膜结缔组织细胞分离扩增的标准化

费尔南德斯·LA、纳西门托·BL、卢卡托-布齐亚克·MC、菲格雷多·CM、卡内罗·E

目的：本研究旨在制定从口腔粘膜结缔组织中分离和扩增纤维间充质细胞群的方案，以用于未来的生物工程方案。方法：为了分离成纤维细胞和祖细胞，我们使用了有口腔手术指征的患者的手术样本。分离方案如下：用添加了抗生素抗真菌剂 (PSA) 的磷酸盐缓冲溶液 (PBS) 清洗组织。将组织放入含有 II 型胶原酶的试管中，并在烤箱中孵育过夜。孵育后，收集胶原酶，并再次用 PBS +PSA 清洗组织一次。随后，进行菌落形成单位 (CFU) 测试。将细胞 (1.0 × 105) 接种在 10 cm² 培养皿中，培养皿中含有高葡萄糖的杜氏改良伊格尔培养基 (DMEM)，并添加了 10% 胎牛血清 (FBS)。用10%福尔马林固定细胞，用结晶紫染色，然后计数菌落。该测定重复进行三次。结果：所有样品的细胞均呈均质形态，具有特征性星状外观。唯一的区别在于形成的菌落数量。与第0天相比，第1天形成的菌落数量显著增加，与第2天相比，菌落数量显著减少。结论：可以建立一种用于人口腔黏膜成纤维细胞原代培养的方案。