药物分析学报

抽象的

腐殖酸毁霉菌环孢素的结构分析及环孢素A对真菌萌发和生长的抑制活性

Paulo S Monzani、Humberto M Pereira、Karina P Gramacho、Fatima C Alvim、Flávio V Meirelles、Glaucius Oliva 和 Júlio CM Cascardo

Moniliophthora perniciosa 是可可丛枝病的病原体。环丝氨酸参与多种细胞过程，包括对环境压力的反应、细胞周期控制、钙信号调节和转录控制。环丝氨酸参与致病性，这在致病真菌对动物和植物的作用中都有描述。在酵母中，钙调磷酸酶和环丝氨酸参与真菌的形态形成和毒性。有证据表明，在没有环孢菌素 A (CsA) 的情况下，环丝氨酸与钙调磷酸酶相互作用，并且有人提出 CsA 的活性在环丝氨酸和钙调磷酸酶之间的调节相互作用中起作用；此外，在这种活动中还观察到了抑菌或杀真菌作用。已经从载体 pET28a 中的子实体 cDNA 克隆了 M. perniciosa 环丝氨酸基因，并表达、纯化和结晶了该蛋白质。环丝氨酸蛋白酶的 apo 形式和与 CsA 结合形式的结构分别在 1.85 和 1.47 Ǻ 处解析。对来自不同生物体的结构进行比较表明环丝氨酸蛋白酶的结构是保守的。在 apo 和结合形式中发现的差异很小；因此，环丝氨酸蛋白酶结构在配体存在时不会发生明显的改变。然而，当 CsA 结合时，氨基酸侧链和水分子之间的各种氢键在配体位点断裂。使用 CsA 的发芽孢子测定表明，其在发芽中抑制活性较低，但对芽管生长的抑制活性较高。这些结果表明，环丝氨酸蛋白酶在生长过程中起重要作用，但在发芽中不起重要作用，因此表明环丝氨酸蛋白酶是针对 M. perniciosa 的抑菌作用的潜在靶标。