生物化学与分析生物化学

抽象的

低温暴露对蓖麻蚕五龄幼虫蛋白质和酶水平影响的时间过程研究（鳞翅目：蓖麻蚕科）

Anita Singh、Vivek Kumar Gupta、Nikhat Jamal Siddiqi、Shaily Tiwari、Anita Gopesh 和 Bechan Sharma

乳酸脱氢酶 (LDH; EC 1.1.1.27) 和苹果酸脱氢酶 (MDH; EC 1.1.1.37) 是参与蓖麻蚕 Philosamia ricini 能量代谢的酶。然而，之前还没有关于低温暴露对蓖麻蚕不同组织中它们水平的影响的研究报道。本研究旨在探讨低温（~10°C）暴露对五龄蓖麻蚕三种主要组织（血淋巴、丝腺和脂肪体）蛋白质和能量代谢酶水平的时间影响。以蓖麻 (Ricinus communis) 新鲜叶子为食的蓖麻蚕幼虫被分成 4 组：对照组在 25 ± 2°C 下饲养，三个实验组在 10 ± 1°C 下饲养，每组包含 50 只幼虫，饲养时间不同（2、4 和 7 天）。通过在 9000 g 下离心组织匀浆来制备无细胞提取物，并用于生化评估（总蛋白质含量、乳酸脱氢酶和苹果酸脱氢酶活性）。对于同工酶分析，在含有 0.2 M 蔗糖和 10 mM EDTA 的缓冲液（0.2 M Tris HCl，pH 7.0）中制备另一组匀浆（20% w/v），并通过天然 PAGE 分析，然后进行活性染色。乳酸脱氢酶和苹果酸脱氢酶的活性在血淋巴中显著降低，而在脂肪体中，两种酶的活性均增加。在丝腺中，乳酸脱氢酶活性均匀降低，而苹果酸脱氢酶活性在所有暴露持续时间内均增加。同工酶分析显示它们的表达谱发生了显著的扰动。低温暴露导致血淋巴中蛋白质含量积累，丝腺和脂肪体组织中蛋白质含量减少。在此条件下，脂肪体成为主要的能量产生器官。乳酸脱氢酶和苹果酸脱氢酶在所有测试的组织中都只表现出一种同工酶的存在。乳酸脱氢酶和苹果酸脱氢酶对低温的同工酶行为在不同组织中有所不同。这些结果表明这些酶的表达和功能的改变可能与幼虫在低温下的适应有关。