Marek Malecki、Mark Anderson、Michael Beauchaine、Songwon Seo、Xenia Tombokan 和 Raf Malecki
简介:卵巢
胚胎癌(ECO),无论是纯的还是与其他肿瘤混合的,都是致命的妇科癌症。
具体目标:这项工作的具体目标是识别、分离、克隆扩增和分子分析卵巢胚胎癌中的多能细胞。
患者和方法:样本采集自临床和组织病理学诊断为晚期纯 ECO 的患者。样本制备首先通过 MACS 对细胞进行负向选择,同时使用针对磷脂酰丝氨酸 (PS)、dsDNA、CD45、CD34、CD19、CD14 的超顺磁性 scFv,然后通过正向选择,同时使用针对 TRA-1-60 和 SSEA-4 的超顺磁性 scFv。用流式细胞术 (FCM)、免疫印迹 (IB)、多光子荧光光谱 (MPFS)、核磁共振光谱 (NMRS) 和全反射 x 射线光谱 (TRXFS) 分析细胞表面展示。用 qRTPCR 和 MPFS 分析 OCT4A 和 Nanog 的转录本。人类多能胚胎干细胞 (ESC)、人类多能睾丸胚胎癌 (ECT)、健康卵巢组织 (HTO)、健康睾丸组织、外周血单核细胞(PBMC) 和骨髓单核细胞 (BMMC) 作为对照。
结果:所研究的卵巢胚胎癌 (ECO) 含有的细胞的 TRA-1-60 和 SSEA-4 表面展示强度明显高于 BMMC、PBMC 和 HTO,但与多能 ESC 和 ECT 相似。它们的形态和超微结构与组织病理学诊断一致。此外,与 PBMC、BMMC 和 HTO 相比,这些细胞 Oct4A 和 Nanog 的表达明显更强,但与多能 ESC 和 ECT 相似。ECO 细胞形成胚状体,分化为外胚层、中胚层和内胚层。这些细胞被诱导分化为肌肉、上皮和神经元。
结论:在此,我们揭示了卵巢胚胎癌中多能干细胞克隆的存在并确定了其分子谱。这些结果应该有助于我们完善这些致命肿瘤的分子诊断。