尼基塔·尼基福罗夫
循环单核细胞的训练可能是动脉壁慢性炎症形成的原因。我们评估了从动脉粥样硬化患者血液中分离的循环单核细胞的激活能力,并试图找到导致炎症的因素。
该研究涉及健康捐赠者(N=36)和亚临床动脉粥样硬化患者(N=40),这些患者通过超声测量颈总动脉内膜中层厚度 (cIMT) 进行诊断。通过磁性 CD14+ 分离法分离单核细胞,并与 1 ug/ml LPS 一起孵育 24 小时,然后通过 ELISA 测量 TNF 分泌。同时,使用 AmplexRedCholesterol Kit 评估循环单核细胞的细胞内胆固醇水平。还将单核细胞与 100 ug/ml 5-氨基乙酰丙酸一起孵育 4 小时,以诱导原卟啉 IX (PpIX) 积累。通过共聚焦显微镜可视化 PpIX 和电位依赖性 Mitotracker 染料的荧光,并使用 ilastic 软件进行分析。
与健康受试者相比,动脉粥样硬化患者血液中分离的 LPS 刺激单核细胞的 TNF 分泌显著增加。观察到 TNF 分泌和细胞内总胆固醇水平与 cIMT 的强相关性,表明动脉粥样硬化患者的单核细胞炎症状态增加,总胆固醇含量增加。令人惊讶的是,LPS 刺激细胞的 TNF 分泌和 cIMT 与单核细胞 Mitotracker/PpIX 比率具有显著相关性,表明动脉粥样硬化患者的训练单核细胞具有更高的线粒体活性。
我们已经证明,动脉粥样硬化患者体内经过免疫训练的单核细胞在 cIMT 增加的情况下,其特征是细胞内总胆固醇水平和线粒体活动增加。
由 RSF 资助(资助编号 20-65-46021)。