干细胞研究与治疗杂志

抽象的

重组 SALL4B 转录激活靶基因表达：一种多能干细胞标记物

袁梦茹、王云、任志华、戴伟、蒋永平

SALL4 是一种重要的转录因子，支持造血干细胞的扩增。SALL4 的表达在几种类型的白血病中也失调。最近的研究表明，SALL4 的主要同工型 SALL4B 受到翻译后机制的严重修饰，这些修饰对其稳定性、亚细胞定位和转录活性至关重要。鉴于 SALL4B 在支持干细胞自我更新和扩增方面的重要性，我们优化了大规模表达和纯化工艺，利用杆状病毒表达载体系统获得 SALL4B。在非变性条件下，用镍亲和层析法有效纯化重组 TAT -SALL4B。免疫印迹证实重组 SALL4B 得到高度表达和纯化。作为测试纯化的 TAT-SALL4B 生物活性的第一步，我们研究了直接补充到培养基中的 TATSALL4B 是否能够通过蛋白质转导过程进入细胞。荧光显微镜观察发现重组TAT-SALL4B以浓度和时间依赖的方式特异性地定位到细胞核中。报告基因检测显示纯化的TAT-SALL4B蛋白激活了OCT4基因启动子，表明重组SALL4B在体内具有转录活性。综合以上结果，我们的研究结果表明TAT-SALL4B可能为支持造血干细胞体外扩增提供一种有希望的因子。