细菌学与寄生虫学杂志

抽象的

EhPgp1 基因核心启动子中 URE4 样序列的转录激活

ME Ramírez、DG Pérez、E Náder 和 C Gómez

EhPgp1 是溶组织内阿米巴耐药滋养体中表达的多药耐药基因之一。我们实验室以前的研究表明，两个 C/EBP 位点参与该基因的转录激活。然而，还有其他相关区域也控制着克隆 C2 中 EhPgp1 表达的调节。在本报告中，我们提供证据表明 EhPgp1 基因的转录至少部分受顺式作用 R9 重复序列和 EhEBP1 蛋白的调节。对 -234 至 -197 bp 区域的结构分析表明，在 -226 至 -203 bp 处存在两个 9 bp 的重复序列 [R9(1) 和 R9(2)]。对 R9 基序的缺失和突变分析显著降低了克隆 C2 滋养体中的启动子活性。EMSA 实验表明溶组织内阿米巴的核蛋白与 R9 序列有特异性结合。而竞争试验表明，强的 DNA-蛋白质相互作用需要多个 R9 序列的存在。此外，使用与 R9 基序相互作用的部分纯化蛋白质和抗 EhEBP1 抗体进行的蛋白质印迹实验识别出 28 kDa 蛋白质。有趣的是，这种抗体在超迁移试验中阻止了 R9 序列与变形虫核蛋白形成 DNA-蛋白质相互作用，这表明与 R9 元件相互作用的蛋白质之一是 EhEBP1 样蛋白质。总之，我们证明 R9 基序被 EhEBP1 蛋白识别并激活 EhPgp1 基因表达。