致癌与突变杂志

抽象的

基于载体的 let-7a miRNA 可抑制 SK-N-MC 和 SHEP 神经母细胞瘤细胞中的多种致癌基因

关杰，郭松，曾晓，罗伊，杨涛，曹杰

目的：本研究旨在确定基于载体的let-7a miRNA在神经母细胞瘤细胞系中的抗肿瘤作用。
方法：构建四环素（tet）诱导的let-7a表达载体，并用于稳定转染SKN-MC和SHEP神经母细胞瘤细胞。通过MTT分析和粘附实验在体外分析四环素诱导的let-7a过表达对细胞增殖和粘附的影响。通过定量实时逆转录聚合酶链反应检测let-7靶致癌基因NRAS、KRAS、c-myc和HMGA2的mRNA表达。使用蛋白质印迹和免疫细胞化学分析N-RAS、K-RAS、c-Myc、HMGA2、NeuN和β3-微管蛋白的蛋白质表达。还观察了SK-N-MC和SHEP细胞的形态。此外，将let-7a诱导载体转染的SHEP细胞注射到裸鼠皮下，并评估体内肿瘤生长情况。
结果：Let-7a在神经母细胞瘤细胞中显著表达，并抑制SK-N-MC和SHEP细胞中的细胞增殖和粘附。Let-7a上调SK-N-MC和SHEP细胞中β3-微管蛋白和NeuN的表达。然而，短的神经突状生长仅在SK-N-MC细胞中观察到，而在SHEP细胞中未观察到。Let-7a过表达降低了SK-N-MC和SHEP细胞中N-RAS和HMGA2蛋白的表达。SK-N-MC细胞中的c-Myc表达也降低。tet诱导组SHEP异种移植瘤的肿瘤大小小于未经四环素诱导的小鼠。
结论：总之，我们的数据证明了载体型 let-7a miRNA 过表达在 SK-N-MC 和 SHEP 神经母细胞瘤细胞中对多种致癌基因具有抗肿瘤作用。Let-7a miRNA 是治疗神经母细胞瘤的潜在治疗分子。