干细胞研究与治疗杂志

抽象的

小鼠睾丸中经白消安治疗后，极小的胚胎样干细胞存活并恢复精子发生

Sandhya Anand、Deepa Bhartiya、Kalpana Sriraman、Hiren Patel 和 Manjramkar DD

研究目标：成年哺乳动物睾丸中含有一群新型的静止、多能、极小的胚胎样干细胞(VSEL) 以及精原干细胞 (SSC)。本研究旨在 (i) 表征睾丸 VSEL (ii) 研究化疗对 VSEL 和 SSC 的不同影响以及 (iii) 通过提供健康的体细胞微环境恢复存活 VSEL 的分化能力。
方法：研究白消安 (25 mg/Kg) 对小鼠睾丸的影响。通过管间途径分别移植同源塞托利细胞(每个睾丸 105 个细胞) 和骨髓间充质细胞 (每个睾丸 104 个细胞)。两个月后通过组织学和生殖细胞标志物 MVH 和 PCNA 的免疫定位研究生态位重建的影响。评估了尾部精子体外使卵母细胞受精的能力。
结果： VSEL 大小为 2-6 μm，SCA-1+/CD45-/LIN-，具有高核质比，占睾丸细胞的 0.03%，而 SSC 特异性标记 GFRa 位于一个独特的、更大的细胞群上。白消安选择性地破坏了 SSC 和其他生殖细胞，然而，核 OCT-4A、Nanog、Sox-2 和 SCA-1 阳性 VSEL（0.06%）存活下来。持续存在的 VSEL 无法分化，可能是因为化疗也影响了由塞托利细胞组成的“微环境”。移植塞托利细胞和间充质细胞两个月后，精子发生完全恢复。移植细胞在存活小管附近形成新小管，可能是 VSEL 增殖和分化所必需的生长因子的来源。移植组的 MVH 和 PCNA 染色均增加。 qRT-PCR 研究显示，在接受白消安治疗的睾丸中存在减数分裂阻滞，移植后可克服这一问题。产生的精子发育至附睾，表现出正常的运动能力和体外受精能力。
结论：结果表明，VSEL 可经受化疗，并可恢复生殖细胞耗尽小鼠的精子发生。结果与解决癌症幸存者的生育问题有直接关系。