植物病理学与微生物学杂志

抽象的

利用比色环介导等温扩增技术对卷顶病毒进行目视检测

穆罕默德·阿明·阿尔马西、迈赫迪·阿格哈普尔-奥贾格坎迪和萨伊德·阿格哈伊

甜菜中的卷顶病毒 (CTV) 属于双生病毒科，是伊朗半干旱地区和世界其他半干旱地区的一个严重问题。有几种诊断方法可以检测 CTV，但是这些技术需要很长时间（3 小时到两天），并且需要复杂的工具。这项研究首次使用比色环介导等温扩增 (LAMP) 技术来减少检测甜菜中 CTV 所需的时间，该技术只需要普通的水浴或加热块。从自然感染的叶组织中提取 DNA。通过 PCR 和 LAMP 反应检测样品中是否存在 Curtovirus 物种，使用物种引物扩增复制相关蛋白 (rep) 基因。LAMP 经过优化，可在等温条件下通过在 63°C 下孵育 30 分钟来扩增 CTV DNA。使用不同的染料目视检测 LAMP 产品。 LAMP 扩增产物在琼脂糖凝胶上电泳时呈现梯状，使用不同染料的阳性结果也表现为颜色变化。结果证实，使用不同染料的 LAMP 为检测甜菜中的 CTV 提供了一种快速安全的检测方法。由于使用其他分子方法，实验室不可避免地需要配备热循环仪或昂贵的检测系统，因此这种检测方法是一种简单、经济高效的分子方法，有可能取代初级实验室中的其他诊断方法，而无需昂贵的设备或专门的技术。在进一步的研究中，它也可以被视为一种可靠的替代病毒检测系统。