Nakano T 和 Ozimek L
甜乳清中发现的牛 κ-酪蛋白糖巨肽 (GMP) 是一种 64 个氨基酸残基的磷酸化糖肽。由于它缺乏包括苯丙氨酸在内的芳香族氨基酸,GMP 被认为是苯丙酮尿症患者的重要氨基酸膳食来源。然而,关于制备供人类食用的无苯丙氨酸 GMP 的信息非常少。因此,本研究通过二乙氨基乙基 (DEAE)-Sephacel 阴离子交换色谱法从市售粗 GMP 中去除含有苯丙氨酸的杂质。结果表明,含有苯丙氨酸的蛋白质或肽不会与柱结合,而占总回收唾液酸 93% 的大多数 GMP 可以与柱结合。纯化的 GMP 占粗 GMP 干重的平均 43%,含有不可检测的苯丙氨酸水平。分析和醋酸纤维素电泳表明,纯化的GMP是一种唾液酸含量高的产品(平均15.5%干重)。Sephacryl S-100凝胶过滤色谱法和Superdex 75尺寸排阻色谱法证实了我们以前的研究结果,即GMP单体形成聚集体并以单个峰形式洗脱,其洗脱体积接近二聚体β-乳球蛋白(36.6 kDa)的洗脱体积。结论是,通过使用DEAE-Sephacel色谱法选择性去除苯丙氨酸杂质,可以高度精制GMP粗制剂。