Lisha Zhao、Suzanne M. Budge、Abdel E. Ghaly、Marianne S. Brooks 和 Deepika Dave
胃蛋白酶是一种重要的酸性蛋白酶,在胃膜中合成并分泌,处于非活性状态,称为胃蛋白酶原 (PG),可用于食品和制造业、胶原蛋白提取、明胶提取和调节消化率。鱼类加工废料可用于生产具有商业价值的副产品,如胃蛋白酶原。在本研究中,使用由聚乙二醇 (PEG) 和盐在 4°C 下形成的水相双相系统 (ATPS) 从红鲈鱼胃中纯化胃蛋白酶原的方法进行了优化。研究了盐种类(MgSO 4、(NH 4 ) 2 SO 4、Na 3 C 6 H 5 O 7和K 2 HPO 4)和浓度(6、7、8、9、10、11、12、13、15、17、19%)对PG分配的影响,并评估了总体积(TV)、体积比(VR)、酶活力(AE)、蛋白质含量(Cp)、比活力(SA)、分配系数(Kp)、纯化倍数(PF)和回收率(RY)等参数。盐种类和盐浓度对各参数均有显著影响。MgSO 4 、 (NH 4 ) 2 SO 4、Na 3 C 6 H 5 O 7和K 2 HPO 4需要不同的临界盐浓度(分别为9、12、12和10%)才能形成双相体系。 TV 和 VR 随着盐浓度的增加而降低,因为盐与水分子形成氢键,形成了更紧凑、有序的水结构。AE、CP、SA、PF 和 RY 在中等盐浓度下表现出最大的增幅,而 KP 则呈现相反的趋势。在 12% (NH 4 ) 2 SO 4下可获得最高的 TV 和 AE 值,而在 12% MgSO 4下可获得最高的 SA 和 PF 值。在 12% 和 15% Na 3 C 6 H 5 O 7下可获得最高的 TV 和 Cp 值。15% 浓度的 (NH 4 ) 2 SO 4可获得最高的 RY (71.7%),因此被选为最佳盐类型和浓度。因此,15% (NH 4 ) 2 SO 4 18% PEG 1500 是最佳的 ATPS 组合,并呈现出最佳的分配效果。采用 ATPS 方法获得的 SA、PF 和 RY 值比采用硫酸铵分馏 (ASF) 方法获得的 SA、PF 和 RY 值高出两倍。